中山大学学报医学科学版
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中山大学学报医学科学版
 
2018年 39卷 1期
刊出日期:2018-01-10

临床研究
技术研究
信息研究
基础研究
   
基础研究
1 郑海崇,曾 勉,何婉媚,陈钦桂,黄春容
Ghrelin对脓毒症大鼠肺泡巨噬细胞炎症信号通路Akt、NF-κB和iNOS的影响
: 【目的】观察生长激素释放肽(ghrelin)对脓毒症大鼠肺泡巨噬细胞(AM)炎症信号通路蛋白激酶 B (Akt)、核因子-κB(NF-κB)及诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的影响。【方法】24只SD雄性大鼠随机分为假手术 (Sham)组、脓毒症(CLP)组、ghrelin干预(CLP+ghrelin)组与ghrelin对照(Sham+ghrelin)组。盲肠结扎穿孔(CLP)构建 大鼠脓毒症模型,分别于术后3 h与5 h腹腔注射20 nmol/kg ghrelin进行干预。观察各组肺组织病理改变并评分;从 支气管肺泡灌洗液(BALF)中提取AM,ELISA测定BALF中炎症因子白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF- α)、白介素-6(IL-6)的水平,qPCR测定AM的IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA的表达水平,免疫荧光、免疫印迹检测AM 的NF-κB p65、IκBα、p-IκBα等NF-κB信号蛋白、Akt、p-Akt等Akt信号蛋白和iNOS蛋白水平。【结果】Ghrelin干预 组肺组织病理学评分[(6.7±0.8)分]、BALF 中 IL-1β[(146±12)pg/mL]和 IL-6[(182±10)pg/mL]分别较脓毒症组 [(10.3±0.7)分、(263±17)pg/mL和(273±5)pg/mL]降低了35.4%、44.5%和33.3%,组间差异有统计学意义(P<0.05), ghrelin干预组BALF中TNF-α与脓毒症组差异无统计学意义。Ghrelin干预组AM的IL-1β、TNF-α和IL-6 mRNA的 表达水平分别较脓毒症组下调 54.38%、53.6%和 46.42%(P<0.05),且 ghrelin 干预组 AM 胞核 NF-κB p65 与胞浆 p- IκBα、p-Akt、iNOS 表达较脓毒症组减少,分别减少 32.58%、45.42%、27.6%和 48.33%,组间差异有统计学意义(P< 0.05)。假手术组与ghrelin对照组上述指标差异无统计学意义。【结论】Ghrelin可降低脓毒症大鼠AM炎症调控信号 通路蛋白Akt、NF-κB和iNOS的活性,进而下调AM促炎因子IL-1β、TNF-α和IL-6的表达,减轻脓毒症急性肺损伤。
2018 Vol. 39 (1): 1-8 [摘要] ( 12 ) [HTML 1KB] [PDF 3333KB] ( 30 )
9 陈 烨,胡文慧,曾 柱,李 兴,蒋天鹏,王黎洲,周 石,宋 杰
柔软纤维蛋白水凝胶对活化态肝星状细胞转分化行为的影响
【目的】探讨活化态肝星状细胞(HSC)在柔软细胞外基质(ECM)中重新恢复为静息态的可能性。 【方法】稳定表达肌成纤维细胞(MFB)表型的HSC-T6培养于由1 mg/mL纤维蛋白水凝胶构建的二维(2D)或三 维(3D)体外培养基质模型之中,利用细胞活力检测试剂盒(CCK8)测定各时间段(24 h、48 h、72 h、96 h)的细胞 增殖活力,免疫荧光及明胶酶谱法检测细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及MMP-9 的表达,原子力显微镜(AFM)探测细胞表面形貌及其变形能力。【结果】经纤维蛋白水凝胶培养后,活化态HSC- T6的细胞增殖活力、α-SMA、MMP-2和MMP-9的表达以及细胞变形能力均发生明显下调(P<0.05),而2D组纤维 蛋白水凝胶对细胞增殖活力的抑制、α-SMA应力纤维的形成以及细胞变形能力的影响与3D组对比亦存在不同 程度的差异(P<0.05)。【结论】柔软的纤维蛋白水凝胶可抑制活化态HSC转分化,但无法使其逆转为α-SMA阴性 的静息态表型
2018 Vol. 39 (1): 9-17 [摘要] ( 2 ) [HTML 1KB] [PDF 3633KB] ( 24 )
18 戴海涛,黄勇慧,林 润,周 酥,陈 斌,张 弢,李 楠,唐可禺,温春勇,杨建勇
磷酰胆碱修饰的氧化石墨烯经导管动脉化疗栓塞治疗肝癌
【目的】研究磷酰胆碱修饰的氧化石墨烯作为药物载体经导管动脉化疗栓塞治疗肝癌的安全性和 有效性。【方法】制备阿霉素负载的叶酸靶向的磷酰胆碱修饰氧化石墨烯(DOX@GO-PCn-FA)。经新西兰大白 兔的耳缘静脉分别注射氧化石墨烯(GO)和DOX@GO-PCn-FA以研究GO和DOX@GO-PCn-FA经静脉注射的安 全性和生物分布。取10只雄性新西兰大白兔建立VX2肝癌模型并以动态增强CT扫描明确肿瘤情况。以股动 脉入路选择性插管至肝叶或肝段动脉,以数字减影血管造影(DSA)明确肿瘤供血动脉。通过导管注射 DOX@GO-PCn-FA对肝癌行选择性栓塞化疗(TACE)。TACE术后第7天行动态增强CT扫描以及主要组织和器 官的病理学检查以研究DOX@GO-PCn-FA对肝癌的栓塞效果以及生物分布和安全性。【结果】经静脉注射GO引 起显著的血栓形成和肺动脉栓塞,而同等剂量的DOX@GO-PCn-FA 未出现这些现象。DOX@GO-PCn-FA 用于 TACE能有效减少肝脏肿瘤血供。病理学检查可见DOX@GO-PCn-FA主要沉积于肿瘤内,未见明显并发症。【结 论】GO-PCn具有良好的生物相容性并能有效地对肝脏肿瘤进行化疗栓塞。
2018 Vol. 39 (1): 18-25 [摘要] ( 14 ) [HTML 1KB] [PDF 8593KB] ( 15 )
26 刘海莉,李 涛,王洪杰,胡 涛,扈燕来,张 静,孙晋浩,董晓光
miR-133b在甲基苯丙胺诱导PC12细胞凋亡中的调控作用
【目的】探讨小分子非编码RNA 133b在甲基苯丙胺(MA)导致神经元毒性损伤中的表达变化及其对神 经细胞凋亡的调控作用。【方法】培养PC12细胞,分为对照组和MA处理组。应用800 μmol/L MA处理PC12细胞建 立神经元损伤细胞模型,显微镜下观察PC12细胞突起变化,采用Hoechst33342/PI双染色检测细胞凋亡变化;采用实 时荧光定量PCR(Real time-PCR)技术检测miR-133b的表达水平变化;并进一步对miR-133b进行功能分析,分别转 染miR-133b模拟物和抑制物以增强或抑制其功能,观察干扰miR-133b功能后MA对PC12细胞凋亡的影响。【结 果】800 μmol/L MA可明显诱导PC12细胞损伤,导致神经突起短缩,神经元凋亡数目增多;荧光定量PCR结果显示 MA毁损PC12细胞后,miR-133b表达明显降低;转染miR-133b模拟物后PC12细胞凋亡率下降,而转染miR-133b抑 制物后PC12细胞凋亡率增加。【结论】高浓度MA可诱导神经细胞损伤、诱发神经元凋亡并下调miR-133b表达, 上调miR-133b表达能降低神经细胞凋亡。miR-133b在MA介导的神经毒性损伤中起至关重要的作用。本研究为 阐明MA的神经毒性损伤机制提供了理论依据,并且通过干扰miR-133b的功能可能成为对抗MA导致神经损伤的 新策略。
2018 Vol. 39 (1): 26-33 [摘要] ( 3 ) [HTML 1KB] [PDF 2254KB] ( 18 )
34 刘素娟,林 曲,柏明军,周楚人,陈俊伟,吴 春,黄明声
KIF23基因沉默对肝癌HepG2细胞增殖、迁移及侵袭的影响
【目的】研究KIF23基因对肝癌HepG2细胞体外增殖、迁移及侵袭的影响,并探讨可能的作用机制。 【方法】化学合成针对KIF23基因的siRNA,通过脂质体转染至HepG2细胞中,应用qRT-PCR 和Western blot法检测 转染后HepG2细胞中KIF23 mRNA和蛋白表达变化。采用CCK-8法和平板克隆法检测KIF23沉默后对HepG2细胞 增殖的影响,并通过细胞划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测KIF23沉默后对迁移和侵袭能力的影响。Western blot法检测KIF23基因沉默后对蛋白激酶B(PKB/Akt)及磷酸化Akt (p-Akt)蛋白表达的影响。【结果】KIF23-siRNA 能有效沉默 HepG2 细胞中 KIF23 的 mRNA 和蛋白表达(P 值均<0.01)。CCK-8 实验、平板克隆实验、划痕实验和 Transwell侵袭实验结果表明,KIF23-siRNA2干扰组与阴性对照组、空白对照组比较,细胞的增殖、迁移和侵袭能力 均明显受到抑制(P值均<0.05)。KIF23-siRNA2干扰组HepG2细胞中总Akt蛋白的表达水平未发生变化,但磷酸化 Akt蛋白的表达水平明显下调(P<0.05)。【结论】KIF23 可能通过激活Akt信号转导通路促进人肝癌细胞的增殖、 迁移及侵袭能力,KIF23有望成为肝癌基因治疗的新靶点。
2018 Vol. 39 (1): 34-40 [摘要] ( 16 ) [HTML 1KB] [PDF 2605KB] ( 17 )
41 陈彦球,张献丹,覃 楠,李 卿,杨 燕
矢车菊素-3-葡萄糖苷抑制血小板趋化因子介导的THP-1细胞迁移
【目的】探讨花色苷单体矢车菊素-3-葡萄糖苷(Cy-3-g)对血小板分泌的炎症相关因子,及对血小板 趋化因子诱导的单核细胞迁移的影响。【方法】健康人纯化血小板分别与不同浓度 Cy-3-g(0、0.5、5、50 μmol/L)孵 育,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血小板分泌的上清液中TGF-β1、β-TG、CCL5的水平;不同浓度Cy-3-g与健康人 外周静脉血共同孵育60 min,流式细胞仪检测白细胞表面的CCR5水平;使用Calcein AM标记THP-1细胞,然后与 不同浓度Cy-3-g孵育后的纯化血小板上清共同作用120 min,于显微镜下观察细胞迁移情况;将THP-1细胞株分别 与不同浓度 Cy-3-g 和 CCR5 抑制剂 Maraviroc 干预 60 min,然后和重组蛋白分子 CCL5(100 nmol/L)共同作用 120 min,显微镜观察细胞迁移情况。【结果】与对照组相比,5、50 μmol/L 的Cy-3-g能显著抑制纯化血小板分泌的TGF- β1、β-TG、CCL5与白细胞表面CCR5水平(P<0.05);同时,5 μmol/L和50 μmol/L的Cy-3-g能显著抑制血小板上清诱 导的THP-1细胞的迁移(P<0.05);Cy-3-g也可显著抑制重组蛋白分子CCL5诱导的THP-1细胞的迁移(P<0.05)。 【结论】花色苷Cy-3-g可以在体外通过抑制CCL5/CCR5介导的THP-1细胞迁移而有效抑制炎症,为花色苷抗炎及 防治心血管疾病提供新的思路。
2018 Vol. 39 (1): 41-47 [摘要] ( 11 ) [HTML 1KB] [PDF 1144KB] ( 2 )
48 孔祥波,刘 仰,陈雪英,李浣洋,李 洁,葛雅平,房思炼
α2-巨球蛋白对X线照射后人皮肤成纤维细胞的抗氧化及抗纤维化的作用
: 【目的】研究α2-巨球蛋白(α2M)对X线照射后人皮肤成纤维细胞(HSF)超氧阴离子(.O 2 - )含量、超 氧化物歧化酶(SOD)活性和HSF细胞向肌成纤维细胞转化过程中的影响。【方法】分别使用0、5、10、15、20 Gy X 线照射HSF细胞,在照射后第1天检测细胞培养基上清液中。O 2 - 含量、SOD活性的变化,在照射后第5天采用 Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达变化,以选定合适的照射剂量。用以上合适剂量照射 HSF细胞,分别于照射前1 h、照射后1 h实验组细胞培养基中加入终浓度为0.25 mg/mL,0.5 mg/mL的α2M,检测 并比较不同实验组细胞培养基上清液中.O 2 - 含量、SOD活性和α-SMA蛋白表达的变化情况。【结果】5~20 Gy X线 照射 HSF 细胞后,.O 2 - 含量逐渐增多,SOD 活性逐渐降低,α-SMA 蛋白表达量逐渐升高,差异具有统计学意义 (P<0.05)。10 Gy X线照射后1 h加入α2M,可明显减少照射后HSF细胞。O 2 - 含量,提高SOD活性,下调放射后 HSF细胞α-SMA的蛋白表达,差异具有统计学意义(P<0.05),照射前1 h给药则无明显变化。【结论】X线照射后 的HSF细胞明显增加.O 2 - 释放量,同时SOD活性降低,并有向肌成纤维细胞转化的趋势;而X线照射后加入α2M 可明显减少受照射HSF细胞的.O 2 - 释放量,提高其SOD活性,并抑制向肌成纤维细胞转化的趋势,说明α2M可通 过抗氧化和抗纤维化起到放射保护作用。
2018 Vol. 39 (1): 48-53 [摘要] ( 8 ) [HTML 1KB] [PDF 1768KB] ( 2 )
54 顾 媛,李志铃,汪燕玲,阮经文
长时程睡眠剥夺对大鼠行为记忆和海马区递质的影响及四神聪电针的预防作用
【目的】探讨连续长时程睡眠剥夺对大鼠行为、记忆和海马区递质的影响及四神聪电针的预防作用。 【方法】采用多平台法进行连续7 d睡眠剥夺造模。实验分阶段进行,一阶段(实验一):将30只SD雌性大鼠随机分 成环境对照组(TC组),睡眠剥夺组(SD组),睡眠剥夺结束后3 d组(3 d after SD)、6 d组(6 d after SD)和11 d组(11 d after SD),即7 d睡眠剥夺结束后再在常规大鼠饲养笼内饲养不同时间,并让大鼠恢复正常睡眠;每组大鼠均为6 只。采用旷场实验观察大鼠自发活动。二阶段(实验二):将18只大鼠随机分成环境对照组(TC组)、睡眠剥夺组 (SD组)、电针组(SD+EA组),每组6只。SD+EA组于睡眠剥夺期间每天上午电针一次,每次20 min,共7 d。采用 Morris水迷宫实验观察各组大鼠空间学习记忆能力。另外,两阶段的酶联免疫吸附测定均在旷场实验和水迷宫检 测结束后取材进行。【结果】实验一,旷场实验:SD 组与 TC 组比,大鼠水平运动和垂直运动的得分减少明显(P< 0.05);但睡眠恢复3 d、6 d、11 d后,3 d组、6 d组、11 d组的大鼠水平运动和垂直运动得分恢复明显,与SD组比较差 异有统计学意义(P<0.05),但与TC组比,3 d组、6 d组虽存在差异(P<0.05),但11 d组差异已无显著性(P>0.05)。 大鼠海马区GABA检测:SD组与TC组比,睡眠剥夺后导致GABA表达下降(P<0.05);但睡眠恢复3 d、6 d后,GABA 的表达明显上升,与SD组比较差异有统计学意义(P<0.05),而与TC组比差异已无显著性(P>0.05);但到第11天时, GABA表达相对于TC组和6 d组又有下降趋势,但与TC组和6 d组相比较无统计学差异(P>0.05)。实验二:Morris 水迷宫检测结果显示,与TC组和电针组比,SD组水下平台的逃避潜伏期明显延长(P<0.05),而穿越原平台所在区 次数明显减少(P<0.05);相反,电针组与TC组相比,无论是水下平台的逃避潜伏期还是穿越原平台所在区次数,均 无统计学意义(P>0.05)。大鼠海马区的5-HT和GABA检测:5-HT的表达,与TC组相比,SD组变化不大(P>0.05); 但电针组与TC组比有下降趋势,且差异有统计学意义(P<0.05)。GABA的表达与5-HT的表达刚好相反,与TC组 比,SD组海马GABA的表达有下降趋势(P<0.05);但电针组与TC组比变化不大(P>0.05)。【结论】7 d连续睡眠剥夺 可导致大鼠行为、记忆能力明显下降,且对大鼠海马区GABA和5-HT表达的影响有异于既往文献报道的少于4 d连 续睡眠剥夺的影响。四神聪电针具有预防长时程睡眠剥夺对大鼠行为记忆损害的作用,其机制可能是通过电针改 善因睡眠剥夺而导致的紊乱的中枢神经递质。
2018 Vol. 39 (1): 54-60 [摘要] ( 0 ) [HTML 1KB] [PDF 1176KB] ( 4 )
61 方虹仪,郭 娜,邢纪斌,罗晨芳
融合蛋白TAT-RabGEF1原核表达载体的构建及蛋白表达
: 【目的】构建PET28a-TAT-RabGEF1重组质粒载体,在E.coli Rosetta(DE3)菌株中高效表达并纯化融合 蛋白,研究TAT-RabGEF1融合蛋白对肥大细胞的跨膜转导活性。【方法】以小鼠组织cDNA为模板,设计上游和下游 含有限制性酶切位点和TAT序列的引物,PCR扩增目的片段TAT-RabGEF1,并通过双酶切构建PET28a-TAT-Rab? GEF1重组质粒载体,在E.coli Rosetta(DE3)大肠杆菌中诱导表达融合蛋白,产物用亲和层析柱纯化后测量浓度及 鉴定。CCK-8检测融合蛋白的细胞毒性,并用荧光显微镜及荧光分光光度计定性定量观察其对小鼠肥大细胞瘤细 胞P815的转导活性。【结果】成功构建了PET28a-TAT-RabGEF1重组载体,高效表达了具有较高特异性,相对分子 质量约为57 ku的融合蛋白TAT-RabGEF1,0.1、1、10 μmol/L浓度的TAT-RabGEF1蛋白对细胞无明显毒性,荧光显 微镜显示1 μmol/L浓度的融合蛋白TAT-RabGEF1具有快速转导进入P815细胞内的能力,且为进入细胞的饱和浓 度。【结论】通过TAT-RabGEF1的原核表达和蛋白纯化分析,证实了TAT-PTD的跨膜转导活性,为研究RabGEF1在 肥大细胞激活途径中的作用提供了物质基础。
2018 Vol. 39 (1): 61-67 [摘要] ( 1 ) [HTML 1KB] [PDF 2251KB] ( 3 )
68 徐国才,王东雁,卢淮武,林仲秋,张丙忠
雷帕霉素逆转卵巢癌细胞系SKOV3/DDP顺铂耐药及其机制探讨
【目的】研究雷帕霉素对卵巢癌顺铂耐药细胞系 SKOV3/DDP 的逆转作用并探讨其相关分子机制。 【方法】采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定卵巢癌顺铂耐药细胞系SKOV3/DDP的耐药倍数、雷帕霉素对其细胞毒 性及逆转倍数;Western blot法检测雷帕霉素对细胞内Akt/mTOR相关通路蛋白表达的影响。【结果】 ① MTT法检 测出雷帕霉素浓度分别为 25、50、100、500 和 1 000 μg/L 对卵巢癌顺铂耐药细胞系 SKOV3/DDP 的抑制率分别为 4.48%、25.30%、35.86%、67.82%和81.43%。选择抑制率小于5%的最大雷帕霉素浓度即25 μg/L作为逆转浓度;② 卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP耐药指数RI为2.21;③ 25 μg/L雷帕霉素对卵巢癌顺铂耐药细胞系SKOV3/DDP 逆转倍数为1.63;④ Western blot结果:加用雷帕霉素后,卵巢癌细胞SKOV3和卵巢癌顺铂耐药细胞SKOV3/DDP的 p-mTOR及其下游的p-p70s6k表达均明显降低。同时,雷帕霉素作用于SKOV3及SKOV3/DDP细胞后,均出现p-Akt 反馈性增高。【结论】雷帕霉素对卵巢癌顺铂耐药细胞系SKOV3/DDP具有耐药逆转作用,其机制可能为通过抑制 Akt/mTOR通路中mTOR及下游相关蛋白表达进而抑制耐药细胞的增殖并促进其凋亡进程。
2018 Vol. 39 (1): 68-72 [摘要] ( 8 ) [HTML 1KB] [PDF 1400KB] ( 2 )
130 周旭辉,郑 梅,谢秋霞,林 玲
轮廓配准法在MRI评估健康成年人左心室心肌细胞外容积分数中的价值
: 【目的】探讨轮廓配准法在MRI纵向弛豫时间定量成像(T1 mapping)技术评估健康成年人左心室心 肌细胞外容积分数(ECV)中的价值。【方法】纳入26名健康志愿者(男16名,女10名),进行心脏MRI检查。采用 改良的Look-Locker 反转恢复(MOLLI)序列采集心底部、心室中部和心尖部三个短轴位对比增强前后的图像。 利用后处理软件通过常规法和配准法分别生成心肌ECV图并比较图像质量。将每个短轴位层面的图像分为形 变组和对照组,比较各层面及各组的常规ECV值和配准ECV值。【结果】16位志愿者(61.5%)的T1 mapping 图像 出现左心室形变。左心室3个短轴位配准ECV图像质量均比常规ECV图高。左心室总体、心室中部和心尖部的 常规 ECV 值[(26.81±2.78)%、(25.38±3.05)%、(28.66±4.10)%]与配准 ECV 值[(25.75±2.42)%、(24.30±2.45)%、 (27.22±3.38)%]均有统计学差异(P值分别为0.001、0.016、0.010)。三个形变组配准ECV值均低于常规ECV值 (P值分别为0.038、0.012、0.016)且标准差较小。心尖部ECV值高于其他层面以及总体ECV值(常规:F=4.799, P=0.004;配准:F=4.822,P=0.003)且标准差较大。【结论】T1 mapping图像出现左心室形变时轮廓配准技术可改善 ECV图像质量,提高ECV值定量精确度。
2018 Vol. 39 (1): 130-137 [摘要] ( 10 ) [HTML 1KB] [PDF 5445KB] ( 2 )
临床研究
73 何志媛,谢双锋,聂大年,尹松梅,何璋海,肖 洁,马丽萍,李益清
mPGES-1、NF-κB p65在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及临床意义
【目的】检测膜结合型前列腺素E2合酶1(mPGES-1)和核转录因子κB p65(NF-κB p65)在弥漫大B 细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中的表达,探究两者与主要临床特征及预后关系,分析它们的潜在的临床价值。【方法】采 用免疫组织化学方法,检测83例DLBCL组织中mPGES-1和NF-κB p65的表达,分析两者与临床特征及预后关系。 【结果】DLBCL组织中mPGES-1、NF-κB p65高表达所占的比例分别为65.1%(54/83)和73.5%(61/83),且两者的表 达水平呈正相关(P<0.05)。这两个蛋白的高表达与B淋巴细胞瘤/白血病蛋白-2(BCL-2)、高Ki-67、高乳酸脱氢 酶(LDH)、淋巴结外侵犯、临床晚期和国际预后指数(IPI)评分高有关(P<0.05)。此外,NF-κB p65与多发性骨髓 瘤癌基因1(MUM1)、病理类型也有关(P<0.05)。生存分析提示,mPGES-1和NF-κB p65是总生存期(OS)的不良 因素,其中NF-κB p65是OS的独立预后因素(P<0.05)。【结论】mPGES-1和NF-κB p65在 DLBCL高表达,且两者之 间呈正相关,这两种蛋白与DLBCL患者的肿瘤进展和不良预后密切相关。
2018 Vol. 39 (1): 73-81 [摘要] ( 1 ) [HTML 1KB] [PDF 3242KB] ( 2 )
82 黄振华,廖瑾莉,肖孝勇,叶 子,蒋 鹏,陈伟栋,熊 艳,杨 震,曾庆理,詹 红
GRACE评分对急性胸痛患者30 d心血管不良事件的预测价值
: 【目的】评价GRACE评分对急诊科急性胸痛患者30 d心血管不良事件(MACE)的预测价值。【方法】 使用前瞻性观察研究的方法纳入 2016 年1月1日至 2016 年4月1日在我院急诊科首诊急性胸痛的患者,记录患 者临床基本资料,完成GRACE评分的计算 ,并对入组的患者进行30 d MACE的随访。【结果】入选209例患者,男 性110例(52.63%),女性99例(47.37%),年龄范围20~98岁,平均年龄(65.28±16.85)岁。发生MACE 12例,其中 急诊死亡2例,住院期间死亡3例,出院后死亡6例,再发心肌梗死1例。与非MACE组相比,MACE组患者年龄, BMI,住院人数,CCU 住院例数、GRACE 评分均高于非 MACE 组患者,两组比较具有统计学差异(P<0.05); GRACE评分预测急性胸痛30 d MACE的ROC曲线下面积(95% CI)为0.819(0.735 -0.902),最佳敏感性为0.92, 特异性为0.65。不同GRACE评分危险分层中对30 d心血管不良事件概率分别为0.95%(低危)、6.67%(中危)、 18.92%(高危)。【结论】GRACE评分对急性胸痛患者30 d心血管不良事件具有良好的预测价值
2018 Vol. 39 (1): 82-86 [摘要] ( 2 ) [HTML 1KB] [PDF 1135KB] ( 3 )
87 翁伟镇,熊 静,曹会娟,陈俊峰,张绍全,张 静,林炳亮
不同时相慢加急性乙肝肝衰竭患者外周血NK细胞及其受体分析
【目的】探讨不同时相慢加急性乙肝肝衰竭患者外周血NK细胞及相关受体的表达特点。【方法】采 用流式细胞术检测各研究组,包括肝衰竭进展期组13例、平台期组33例、健康对照组13例的外周血NK细胞比例、 活化性受体NKG2D、NKp30、NKp46、抑制性受体NKG2A、KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1、杀伤功能相关因子Perforin、 GranzymeB、FasL 的表达情况。【结果】进展期患者 NK 细胞比例较平台期患者、正常人外周血 NK 细胞比例低 (P=0.021),正常人 KIR3DL1 比例较进展期患者、平台期患者外周血 KIR3DL1 比例高(P=0.036),正常人外周血 FasL 表达比例明显较进展期患者、平台期患者外周血 FasL 表达比例低(P<0.001)。【结论】进展期肝衰竭患者外 周血 NK 细胞、抑制性受体 KIR3DL1 较平台期、正常人下降,而 FasL 表达升高,这种改变和不同时相肝衰竭患者 免疫状况有关。
2018 Vol. 39 (1): 87-92 [摘要] ( 2 ) [HTML 1KB] [PDF 2239KB] ( 2 )
93 张宁锋,刘彩霞,郑灵燕,区颂邦,梁海霞,钟慧玲,陈静华
精子DNA碎片率及顶体酶活性对男性不育的诊断价值
【目的】探讨精子DNA碎片率与顶体酶活性检测对男性不育的诊断价值。【方法】回顾性分析近三年 前来本院就诊的902例男性患者的精液常规参数及精子DNA碎片率和顶体酶活性水平。【结果】按DNA碎片率水 平将所有患者分为4组(≤10%,11~20%,21~30%,≥31%),各组患者的年龄、精子浓度、精子总活力、前向运动率以 及顶体酶活性存在统计学差异;按精子顶体酶活性正常与否将患者分为两组后,两组间精子浓度、精子总数、精子 总活力、前向运动率、正常形态率、畸形精子指数、DNA碎片率均有统计学差异。相关性分析显示,DNA碎片率与精 子浓度、精子活力、前向运动率、精子总数及顶体酶活性呈负相关关系,与畸形精子指数呈正相关关系;顶体酶与精 子浓度、精子活力、前向运动率、精子总数、正常形态率呈正相关关系,与头部异常率、畸形精子指数、DNA碎片率负 相关。【结论】精子DNA碎片率及顶体酶活性水平均可以在一定程度上反映精子参数水平,其中DFI更能反映精 子活力水平,顶体酶活性则与精子形态更为相关。两者都是精子质量评估更为客观而全面的指标。
2018 Vol. 39 (1): 93-100 [摘要] ( 1 ) [HTML 1KB] [PDF 979KB] ( 3 )
101 李民英,张 健,何秀芳,张 健,郑斯明,周嘉雄,魏 婷
干扰素调节因子5下调PARP-1抑制鼻咽癌细胞的侵袭力
【目的】探讨干扰素调节因子5(IFR5)是否通过下调DNA修复酶PARP-1,进而抑制鼻咽癌细胞的侵 袭能力。【方法】本研究使用的临床标本是经病理确诊的鼻咽癌患者组织标本46例和正常组织51例。免疫组化 检测鼻咽癌组织和正常组织中IRF5和PARP-1的表达。构建IFR5过表达质粒,上调鼻咽癌细胞CNE-2中IFR5 表达,荧光定量PCR(QPCR)和免疫印迹确定建立IRF5过表达细胞。上调IRF5表达后,划痕和transwell实验检 测细胞侵袭能力的改变,QPCR 和免疫印迹检测PARP-1表达量的变化。上调IFR5表达的同时加入PARP-1过 表达质粒,观察PARP-1是否可逆转IFR5对侵袭能力的影响。【结果】免疫组化结果表明IRF5在癌组织中的表达 量低于正常组织,而PARP-1则相反。QPCR和免疫印迹确定建立IRF5 mRNA和蛋白过表达的细胞株CNE-2/ IFR5。细胞划痕实验显示CNE-2/IFR5愈合率较对照组降低(P<0.01),transwell实验表明CNE-2/IFR5细胞穿过 基底膜的数目小于对照组(P<0.01),提示上调 IFR5 可抑制鼻咽癌细胞的侵袭能力。上调 IFR5 后,PARP-1 mRNA和蛋白的表达量降低(P<0.01);上调IFR5表达的同时过表达PARP-1,可逆转单独上调IRF5对细胞侵袭 能力的改变。提示 IFR5 可通过下调 PARP-1 进而抑制鼻咽癌癌细胞的侵袭能力。【结论】IFR5 可通过下调 PARP-1进而抑制鼻咽癌癌细胞的侵袭能力。本研究可能为降低鼻咽癌侵袭能力提供新的靶点。
2018 Vol. 39 (1): 101-106 [摘要] ( 2 ) [HTML 1KB] [PDF 4261KB] ( 2 )
107 闫丽敏,代鸣明,于 航
颈内动脉支架置入术联合药物治疗对重度颈内动脉狭窄者脑血流灌注及认知功能的影响
: 【目的】探讨颈内动脉支架置入术联合药物治疗对重度颈内动脉狭窄患者脑血流灌注参数及认知功能 的影响。【方法】选择2014年6月-2016年6月收治的重度颈内动脉狭窄患者124例为研究对象,采用随机数字表法 分为治疗组和对照组各62例,对照组单纯药物治疗,治疗组给予颈内动脉支架置术后联合药物治疗。随访1年, 比较两组脑血流灌注参数、认知功能、不良事件等指标。【结果】治疗组相对达峰时间(rTTP)、相对平均通过时间 (rMTT)、相对脑血容量(rCBV)、相对脑血流量(rCBF)均明显低于对照组(P<0.05,P<0.01);简易精神状态检查表 (MMSE)评分、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分明显高于对照组(P<0.05);血管闭塞、血管再狭窄、新发脑梗塞、 短暂性脑缺血明显低于对照组(1.61% vs 11.29%,4.84% vs 19.35%,1.61% vs 14.52%,4.84% vs 17.74,P<0.05)。【结 论】颈内动脉支架置入术联合药物治疗有助于改善重度颈内动脉狭窄患者脑血流灌,提高认知功能,预防不良事件 发生。
2018 Vol. 39 (1): 107-112 [摘要] ( 14 ) [HTML 1KB] [PDF 947KB] ( 5 )
113 黄卓梅,汪 飞,高晓枫,梁伟玲
右美托咪定气管内给药对妇科腹腔镜手术患者全麻苏醒期的影响
【目的】评价右美托咪定气管内给药对妇科腹腔镜手术患者全麻苏醒期的影响。【方法】选择择期全麻 妇科腹腔镜手术患者90例,预计手术时间1~2 h,术后需拔除气管导管,ASAⅠ~Ⅱ级,年龄18~64岁,体质量40~80 kg,采用随机数字表法,将其分为3组(n=30):对照组(C组)、右美托咪定气管内给药组(D1组)、右美托咪定静脉给 药组(D2组)。手术开始时D1组通过一次性使用麻醉增强Ⅲ型气管导管的注药孔注入右美托咪定2 μg/kg,D2组患 者单次静脉泵注右美托咪定0.5 μg/kg,10 min内注药完毕,C组静脉泵注生理盐水。术毕拔除气管导管送入麻醉恢 复室。记录患者给右美托咪定即刻(T 0 )、给药后5、10 、15、30 min(记为T 1 ~T 4 )、拔管即刻(T 5 )、拔管后5、10、15、30 min(记为T 6 ~ T 9 )时MAP、HR。记录患者自主呼吸恢复时间等、拔管期间呛咳评分和镇静-躁动(SAS)评分、拔管后 30 min时视觉模拟评分(VAS)和Ramsay镇静评分。【结果】① 与同组T0时比较,C组T 5 ~T 7 时点MAP、HR显著升高, D1组和D2组T 5 ~T 6 时点MAP显著升高,T 5 ~T 7 时点HR显著升高(P<0.05);与C组同时间点比较,T 5 ~T 7 时点D1组和 D2组MAP、HR显著降低(P<0.05);② D1、D2组呛咳评分、SAS评分和VAS评分显著低于C组(P<0.05);③ D1、D2组 躁动、高血压和心动过速发生率显著低于C组(P<0.05)。【结论】静脉注射或气管内给予右美托咪定均能使妇科腹 腔镜手术患者全麻恢复期的血流动力学更稳定,减少呛咳和躁动的发生,提高了全麻苏醒期的质量。
2018 Vol. 39 (1): 113-118 [摘要] ( 19 ) [HTML 1KB] [PDF 957KB] ( 6 )
技术研究
119 常利红,黄子真,黄健聪,王 君,陈晓红,赖晓萍,张革化
miR-18a过表达及抑制表达人鼻咽癌细胞株的构建
【目的】建立稳定miR-18a过表达及表达的人鼻咽癌细胞系,为研究miR-18a在鼻咽癌发生发展中 的功能奠定基础。【方法】将miR-18a前体的编码基因片段及miR-18a反义寡核苷酸克隆到慢病毒载体中,DNA 测序鉴定;将构建好的载体转染293T细胞,获得重组miR-18a过表达及抑制表达的慢病毒载体,感染人鼻咽癌细 胞CNE1和CNE2,嘌呤霉素筛选获得稳定干扰miR-18a表达及过表达miR-18a的细胞系,PCR及western blot鉴 定。【结果】成功构建真核表达的慢病毒miR-18a干扰载体及过表达载体,滴度均为3×10 8 TU/mL;转染miR-18a 抑制表达的慢病毒载体的CNE1和CNE2中ATM表达增高;与对照病毒转染相比,转染miR-18a过表达慢病毒载 体的CNE1(20.3倍,P<0.01)和CNE2(122.5倍,P<0.01)中miR-18a表达显著增高,靶蛋白ATM表达下调。【结论】 成功构建人miR-18a慢病毒抑制表达和过表达载体,并获得相应的慢病毒稳转人鼻咽癌细胞株。
2018 Vol. 39 (1): 119-129 [摘要] ( 1 ) [HTML 1KB] [PDF 10240KB] ( 4 )
信息研究
138 韩振艳,白小艺,张 媛,尹玉竹,侯红瑛
初次产检孕妇对HBV感染和母婴传播防治知识知晓率的横断面调查
【目的】了解初次产检的孕妇对乙型肝炎(简称乙肝)病毒(HBV)感染和母婴传播防治措施的相关知 识的掌握情况。【方法】选择在2014年5月至8月在中山大学附属第三医院产科门诊初次产检的孕妇为调查对象, 发放“乙肝病毒母婴传播知识的调查问卷”,由调查对象匿名填写问卷后回收。调查这些孕妇对乙肝病毒感染和 母婴传播相关知识的知晓率,及对HBV母婴传播防治措施的态度,并分析知识和态度的影响因素。采用方差分 析、Logistic 回归方法进行统计学分析。【结果】①共发放调查问卷500份,有效问卷的回收率为91.8%(459/500)。 ② 11项乙肝相关知识的题目总分为11分,受访者的平均得分为6.09± 3.29。对乙肝的并发症及母婴传播导致并发 症风险增加的知晓率约50%;对乙肝疫苗的知晓率为65.3%;对乙肝传播途径包括通过血液传播、无保护的性行为 传播、母婴传播、不安全的针头或尖锐物传播的知晓率分别为72.0%、48.9%、75.9%和66.3%。③ 6项对乙肝母婴传 播防治措施态度的题目总分为6分,受访者的平均得分为3.84±1.50。80%以上的孕妇愿意在妊娠期筛查乙肝、新生 儿注射乙肝疫苗;如果发生 HBV 感染,为了降低母婴传播,83.1%的孕妇愿意新生儿注射乙肝免疫球蛋白,仅有 16.2%的孕妇愿意妊娠期接受药物治疗。④大学或大学以上教育程度是取得乙肝知识高分的独立影响因素(OR= 5.96,95% CI:2.95~12.06)。较高的教育程度是预测取得态度高分的独立影响因素,与初中或初中以下教育程度比 较,高中和大学或大学以上教育程度的OR值分别为1.90(95% CI:1.01~3.55)和2.50(95% CI:1.44~4.33)。【结论】虽 然教育程度是影响受访者乙肝知识和对母婴阻断措施态度的独立因素,但初次产检孕妇对于乙肝相关知识的了解 存在明显不足,需要继续加强乙肝相关知识的宣教。
2018 Vol. 39 (1): 138-144 [摘要] ( 13 ) [HTML 1KB] [PDF 961KB] ( 4 )
145 贾 搏,叶漫文,褚洪星,邱小玲,孙 翔,王治平,赵建江
Zimmer种植系统在下颌磨牙区即刻种植的临床应用
: 【目的】评价Zimmer种植体在下颌磨牙区即刻种植的临床效果。【方法】选择67 例 89颗下颌磨牙区即 刻种植病例,均为微创拔牙术后即刻植入Zimmer种植体,其中76颗在种植体和拔牙窝骨壁之间植入Bio-oss Colla? gen并缝合固定以关闭拔牙窝。种植术后 3~6 个月完成永久修复,临床随访 6~24 个月。【结果】临床随访期内种植 体存留率100%,89颗种植体均达到临床和放射学上的骨结合并成功负载。【结论】Zimmer种植体在下颌磨牙区采 用即刻种植并以Bio-oss Collagen关闭种植体和拔牙窝骨壁之间间隙可以获得良好骨结合,缩短患者就诊时间,简 化手术程序,获得了理想的治疗效果。
2018 Vol. 39 (1): 145-151 [摘要] ( 11 ) [HTML 1KB] [PDF 2748KB] ( 4 )
152 戴海蓉,周 晖,李巧飞,凌宏忠,谢继璜,李玉华,曹光玲
二氧化碳激光打孔预处理联合5-氨基酮戊酸光动力治疗难治性巨大跖疣
: 【目的】探讨二氧化碳激光打孔预处理联合5-氨基酮戊酸(ALA)光动力治疗难治性巨大跖疣的疗效和 安全性。【方法】入组难治性巨大跖疣患者,采用二氧化碳激光打孔预处理疣体组织,再进行ALA光动力治疗,评估 治愈率和不良反应。【结果】20例患者接受1-3次光动力治疗后,治愈率达85%(17/20)。其中2例(10%)接受1次治 疗,5例(25%)接受2次治疗,10例(50%)接受3次治疗。均未见感染或瘢痕。人乳头瘤病毒(HPV)单一型别感染5 例,双重或多重HPV型别感染15例,两组之间跖疣治愈率无统计差异。【结论】采用超脉冲二氧化碳激光打孔联 合光动力治疗,可提高巨大难治性跖疣的治疗效果。HPV型别与难治性跖疣病情和治疗预后的相关性有待进一步 深入研究。
2018 Vol. 39 (1): 152-156 [摘要] ( 13 ) [HTML 1KB] [PDF 1334KB] ( 3 )
157 刘 涛,李志武,丁街生,董秀芹
调Q脉冲激光联合药物治疗轻中度玫瑰痤疮的疗效观察
: 【目的】评价联合药物和调Q脉冲激光结合的方法治疗玫瑰痤疮的疗效和安全性。【方法】选取广东 省人民医院痤疮门诊73例轻中度玫瑰痤疮患者作为观察对象,随机分为两组,对照组(36例)给予药物治疗,治 疗组(37例)在药物治疗基础上联合调Q 1 064 nm脉冲激光治疗,治疗9周后评估疗效。【结果】两组患者经治疗 后,两组痤疮皮损均有所减轻,治疗前后有显著性差异(P<0.05);治疗组患者有效率 83.8%,对照组有效率 61.1%,治疗组有效率显著高于对照组(P<0.05)。【结论】系统服药联合调Q脉冲激光等治疗玫瑰痤疮安全、有效, 疗效优于单纯药物治疗,值得临床借鉴和推广应用。
2018 Vol. 39 (1): 157-160 [摘要] ( 13 ) [HTML 1KB] [PDF 952KB] ( 3 )

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